表观基因组学 蛋白-DNA互作研究 服务编号 ZKPR-EPI-005

ChIP-seq 染色质免疫共沉淀测序
蛋白-DNA互作研究金标准

基于高通量测序平台,提供组蛋白修饰、转录因子、RNA聚合酶等靶标全基因组结合位点鉴定,严格参照ENCODE标准质控,覆盖人、大小鼠、斑马鱼、拟南芥等20+物种

金标准
ENCODE 规范质控
全基因组
单碱基分辨率鉴定
20+物种
人/鼠/斑马鱼/拟南芥
千余例
累计项目经验
ChIP-seq Peak Calling MACS2 / HOMER
H3K4me3 H3K27ac TF ChIP Gene Model chr1: 12,345,000 - 12,625,000 NovaSeq · MACS2 Peak Calling
全基因组结合位点鉴定
v1.0
ENCODE规范
产品概述

ChIP-seq · 蛋白-DNA互作研究的金标准方法

染色质免疫共沉淀测序(Chromatin Immunoprecipitation Sequencing, ChIP-seq)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的经典技术,也是表观基因组学研究的金标准方法。通过甲醛交联将细胞内与DNA结合的蛋白质固定在染色质上,超声破碎将染色质打断为200-500bp片段,使用靶标蛋白特异性抗体沉淀蛋白-DNA复合物,解交联纯化DNA后建库并进行高通量测序,将测序reads比对到参考基因组,获得靶蛋白在全基因组上的结合位点分布图。

应用领域

表观遗传调控
转录调控网络
发育分化机制
疾病发生机制
药物靶点筛选
技术原理与实验流程

从交联免疫沉淀到全基因组结合图谱

通过特异性抗体富集与靶蛋白结合的DNA片段,经高通量测序后在全基因组范围内精确定位蛋白结合位点。

1

甲醛交联

固定体内蛋白-DNA相互作用

2

染色质破碎

超声打断至200-500bp

3

免疫沉淀

靶标抗体特异性富集

4

解交联纯化

释放并纯化ChIP DNA

5

建库质检

文库构建与质量控制

6

高通量测序

主流高通量测序平台

7

生信分析

Peak Calling与功能注释

测序平台

主流高通量测序平台系列,数据产出稳定,质量可靠。

NovaSeq 6000 NextSeq 550

适用靶标

适用于多种蛋白-DNA互作研究靶标,涵盖表观修饰与调控因子。

组蛋白修饰 转录因子 RNA聚合酶
技术优势

多重保障 · 高质量ChIP-seq数据

严格参照ENCODE实验与分析规范,从实验到分析全流程多重质控,确保数据质量与结果可靠性。

全基因组覆盖

一次性鉴定靶蛋白在全基因组范围的结合位点,无偏向性覆盖整个基因组。

单碱基分辨率

可精确鉴定转录因子结合位点motif,定位核心调控元件及功能区域。

金标准方法

组蛋白修饰和转录因子结合研究的行业标准方法,文献认可度高。

应用广泛

适用于表观遗传调控、转录调控、发育分化、疾病机制等多个研究方向。

严格质控体系

参照ENCODE实验与分析规范,多重质控确保数据质量,结果可追溯。

丰富项目经验

累计完成千余例项目,覆盖人、大小鼠、斑马鱼、拟南芥等20+物种。

测序策略

针对不同靶标的推荐测序方案

根据靶标类型选择合适的测序深度与读长,确保Peak Calling的准确性与可靠性。项目周期视项目而定。

靶标类型 推荐测序深度 测序读长
组蛋白修饰(窄峰型) 20~30M clean reads PE 150 bp
组蛋白修饰(广域型) 40~50M clean reads PE 150 bp
转录因子/辅助因子 20~30M clean reads PE 150 bp
RNA聚合酶(Pol II) 30~40M clean reads PE 150 bp
Input对照 10~15M clean reads PE 150 bp

* 以上为推荐参数,具体测序策略根据研究目的与样本情况定制。项目周期视项目而定。

生信分析内容

标准分析 + 高级分析 全面覆盖研究需求

从原始数据质控到Peak Calling、功能注释与可视化,提供完整的生信分析流程,并支持多种高级定制分析。

标准分析

原始数据质控与过滤
参考基因组比对与统计
插入片段评估
Peak Calling(MACS2/HOMER)
Peak统计与注释
关联基因GO/KEGG富集分析
Motif分析
信号可视化(bigWig/热图/谱图)

高级分析(可选)

多样本差异peak分析
多组学联合分析(RNA-seq/ATAC-seq/WGBS)
超级增强子鉴定
Broad Peak宽峰鉴定
染色质状态分析(ChromHMM)
自定义分析
样本要求

样本送样要求与建议

规范的样本处理是ChIP-seq成功的关键。请严格按照以下要求准备样本,如有疑问请联系技术支持。

细胞样本(交联后)

推荐量:5×10⁶ ~ 1×10⁷ cells

最低量:2×10⁶ cells

组织样本(交联后)

推荐量:100 ~ 200 mg

最低量:50 mg

ChIP后DNA

推荐量:5 ~ 10 ng

最低量:1 ng

送样注意事项

需设置Input对照,用于校正背景噪音
建议每组至少2个生物学重复
差异分析需3个及以上生物学重复
推荐使用ChIP-grade验证抗体
服务方案

灵活选择 · 满足不同研究需求

提供基础、高级、定制三种服务方案,根据研究目标与预算灵活选择。项目周期视项目而定。

基础方案

标准ChIP-seq

适合常规组蛋白修饰与转录因子研究

  • 标准测序深度
  • 标准Peak Calling分析
  • GO/KEGG富集分析
  • 标准可视化图表
咨询详情
推荐
高级方案

深度ChIP-seq + 多组学

适合深入机制研究与多组学联合分析

  • 更高测序深度
  • 差异Peak分析
  • Motif & 超级增强子分析
  • 多组学联合(可选)
  • 定制化图表与报告
获取方案
定制方案

定制化研究方案

适合特殊物种与特殊研究设计

  • 非模式物种分析
  • 染色质状态分析(ChromHMM)
  • 抗体筛选与评估
  • 实验设计与方案咨询
  • 全程技术支持
定制方案
常见问题

FAQ

关于ChIP-seq服务,您可能想了解的问题

1. 样本量少能做ChIP-seq吗?
传统ChIP-seq建议不低于2×10⁶细胞,以确保足够的免疫沉淀效率和数据质量。
如果样本量极少,可考虑选择CUT&Tag技术,该技术对起始细胞量要求更低,适合稀缺样本。我们可根据您的样本情况推荐更合适的技术方案。
2. 没有ChIP级抗体能用吗?
不推荐使用未经过ChIP验证的抗体,项目失败风险较高,可能导致富集效率不足或非特异性结合。
我们可协助您筛选已验证的ChIP-grade抗体,或提供抗体代购服务,以确保实验成功率。如您已有抗体但不确定是否适用,也可提供预实验评估服务。
3. 必须做Input对照吗?
Input对照是必要的。Input是同一染色质样本在免疫沉淀前取出的部分,反映了基因组DNA的原始分布情况。
Input对照的作用:
  • 校正基因组背景噪音和测序偏好
  • 降低Peak Calling的假阳性率
  • 评估ChIP富集效率

ENCODE等权威标准均要求必须包含Input对照,我们强烈建议每组样本都设置对应的Input对照。
4. 需要生物学重复吗?
生物学重复对于确保实验结果的可靠性和可重复性非常重要。
组蛋白修饰:建议至少2个生物学重复。
转录因子或差异分析:建议3个及以上生物学重复,以满足统计学差异分析的要求。
具体重复数需根据研究目的、样本类型和统计分析方法综合考虑。
5. 非模式生物可以做吗?
只要该物种有参考基因组序列,原则上都可以进行ChIP-seq分析。
对于非模式物种,需要提前评估以下因素:
  • 参考基因组的组装质量与注释完整度
  • 目标抗体的物种交叉反应性
  • 功能注释数据库的丰富程度

建议在项目启动前联系我们的技术团队,提供物种信息与研究目的,我们会进行可行性评估并给出针对性建议。
资源中心

延伸研究 · 学习资源

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服务热线
021-58086128
邮箱
market@sinomics.com
地址
上海市康新公路3399弄26号楼7-8层

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